实验室中精液稀释几个细节处理
发布时间:2009-5-12 14:57:00 来源:养猪网
1、温度        1.1采精前的准备  在精液采集前所有与精液接触的物品包括采精杯、精液分装瓶(如果有条件)等全部要在恒温箱37 ℃预热(适季节变化,预热温度也将有变化),保证在采精的时候精液与其接触物品温度相差不高于0.5 ℃。精液稀释也要提前预热,放在37 ℃水浴锅中,保证稀释液混合均匀。实验室空调设置为25 ℃最为适宜。         1.2精液的稀释        稀释液和原精的温差不得高于0.5 ℃,否则将严重影响精液稀释后的精子活力。         1.3精液的分装、保存与运输        精液稀释后要立即进行分装,从恒温箱中取出精液分装瓶,使稀释后精液和精液分装瓶的温差不高于0.5 ℃。精液分装后不宜将精液立即放入17℃保温箱中保存,让精液在室温25 ℃缓慢降温后,再将其放入保温箱。精液运输过程中同时要应用恒温箱,以保证精子的活力不受到任何影响。         2、精液称重        将电子天平清零,然后把预热好的保温杯称重,再交由生产人员采精。把装有精液的保温杯再次称重。        精液重量=采精后的保温杯重-预热后的杯重        精液体积=精液重量        保温杯中精液重量的准确性        实验室负责预热保温杯以及精液称量稀释。在每次保温杯预热和精液称重的过程中,都会有6至40 g的误差。         造成误差的原因:在采精前,保温杯需要预热,方法使用37 ℃温水盛满保温杯,然后倒掉,放入集精袋和滤纸。在这个过程中,保温杯的内外壁都沾有水,外壁可以擦去,而为了不影响保温杯内温度,内壁一般不擦。这就影响了保温杯整体重量。          如果里面有过多的水没有倒掉,就会有大的误差,即使杯中无水分倒出,也会有10 g的误差。误差量的存在,可能影响生产中对个别猪的使役,以及对猪的饲喂管理。解决方法:1应该在每次采集精液称重后适当减去水引起的误差部分。            2实验室人员在做保温杯时尽量将水倒干,避免误差过大。         3、精液各项直观指标测定          3.1容量:新鲜精液容量应在100~ 250 mL ;过多可能混有尿液或副性腺有炎症,过少说明采精方法不当或公猪生精能力降低。          3.2色泽:精液色泽应为乳白色到灰白色,红色说明有血液,绿色说明有脓液,清黄色说明混有尿液,色泽不正常的精液必须废弃。          3.3气味:精液应没有明显异味,有腥味说明有脓液,有臊味说明混有尿液,有异味的精液必须废弃;          3.4密度测定:估测,可通过精液的外观检查如色泽估测精子密度,呈乳白色说明精子密度大,白度越高说明浓度越高,相反则说明精子密度低。          4、精液的稀释         经过品质检查合格的精液应立即进行稀释,将稀释液缓慢倒入精液中,并轻轻搅动或摇动。稀释时,最好精液仍放在原来的袋中。一般可根据需要和计算(估算)的稀释倍数、精液量,在精液中加入适量的稀释液。最少稀释倍数为1:2.5,最大稀释倍数不超过1:9。          如果是收集的是全份精液(不包括精清),可按1:3稀释,稀释后每个剂量应为80 mL,每个剂量含20 mL鲜精,这样可保证每个剂量中有30~60亿个精子。同样,如果是浓份精液,可按1:7稀释,每个剂量80 mL,每份含鲜精10 mL。           5、存放时间         采精后应及时进行全份精液稀释,保证精子活力。有试验表明浓份精液2小时左右精子活力为0。          精子应在将稀释后精液置室温(25℃左右)2小时,然后放入精液保存箱 (17 ℃)。